染色原理

• 髓鞘是包裹在神经轴突外面的管状鞘结构，即髓鞘由髓鞘细胞和细胞膜组成，呈节段性，是神经细胞的质膜沿着轴索的轴心螺旋缠绕形成的多层脂双层结构，髓鞘上有朗飞氏结，可使神经冲动跳跃传递，具有绝缘作用并提高神经冲动的传导速度，在中枢和外周神经系统中起保护轴突作用。髓鞘由鞘磷脂构成，其成分主要是类脂质和蛋白质，固蓝（Luxol fast blue）属于铜-酞箐染料，在酒精溶液中具有髓鞘磷脂结构的染色特性，
• 应用LFB髓鞘染色可以很好地显示出神经组织的髓鞘结构。髓鞘染色具有一定的病理诊断意义，如果髓鞘发生病变，在染色时髓鞘数量显著减少或消失，或髓鞘形态不规则，出现髓鞘不完整、变性、坏死以及修复。神经纤维受损时，髓鞘可出现膨胀、曲折成球形、断裂或脱鞘完全消失等变化。

染色步骤

1. 石蜡切片脱蜡至水。
2. 将1%固蓝溶液在65℃烘箱提前预热30min。组织切片进入预热的0.1%固蓝溶液中65℃染色4h（加盖防止液体蒸发）。
3. 室温自然冷却后取出切片，自来水洗至呈无色。
4. 切片迅速浸入05%碳酸锂分化液中快速分化5s，然后取出切片立即置于70%乙醇中快速分化10s，即使切片交替进入0.05%碳酸锂分化液和70%乙醇中进行分化，及时镜检直至髓鞘呈蓝色背景无色，然后水洗终止分化。
5. 切片经3次无水乙醇脱水，每次5min，再经二甲苯透明5min，然后用中性树胶封片。

染色结果

• 神经髓鞘呈蓝色，背景淡蓝色或近乎无色。

案例展示