细胞克隆形成实验
来源：细胞生物学研究平台
实验原理
- 单个细胞在体外增值6代以上，其后代所形成的细胞群体，称为集落或克隆；
- 集落形成实验是测定细胞增殖能力的有效方法之一，贴壁后的细胞不一定每个都能增值和形成克隆，而形成克隆的细胞必为贴壁和有增值活力的细胞；
- 细胞克隆形成率表示接种细胞后贴壁的细胞成活并形成克隆的数量，常用的方法有平板集落形成实验，软琼脂集落形成实验。
实验步骤
- 收集传代培养的处于对数生长期的细胞，加入培养基制成细胞悬液；以每孔300-600个细胞/孔的细胞密度接种于6孔板中，将6孔板置于37oC，5％CO2的细胞培养箱中培养24小时后细胞贴壁融合后加药（注意：细胞数量和时间根据实验条件摸索）；
- 加入2mL含不同浓度的药物培养适当的时间，每组设置3个复孔，并设置空白对照，置于37oC，5％CO2的细胞培养箱中培养，以后用含有不同药物浓度的培养基每3天换液一次，在细胞孵箱中继续培养13天；
- 待时间到，用冷PBS溶液洗2次，4%的多聚甲醛固定15～30min，固定后用冷PBS洗2次，5%的结晶紫染色。
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