实验原理

• 采用DNA酶降解实验来探究纳米粒对DNA的保护作用

实验步骤

1. 将质粒DNA，加入到1U的DNase I中 (500 μL，10 mM MgCl₂)，37℃反应不同时间后，加入 EDTA终止DNA降解，琼脂糖凝胶电泳，100 V，30分钟，拍照采集；
2. 将纳米复合物与1 U的DNase I在37 ℃孵育不同时间后，加入EDTA终止DNA的降解。琼脂糖凝胶电泳，100 V，30分钟，拍照采集；
3. 进一步，采用不同方法处理，将质粒DNA、DNA被DNase I降解后的终止产物、纳米复合物、纳米复合物被DNase I降解后的终止产物、纳米复合物被DNase I降解后，采用SDS置换，以及纳米复合物直接被SDS置换产物，纳米复合物被SDS置换后，采用DNase I降解后的产物，分别进行琼脂糖凝胶电泳分析；
4. 将纳米复合物被1 U的DNase I降解不同时间后，加入EDTA终止DNA的降解。所有样品立即放置在冰上冷却，加入Triton X-100到每个样品中，室温下分离5分钟。采用SDS置换10分钟后进行琼脂糖凝胶电泳分析。

案例展示