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qPCR

来源：分子生物学研究平台

实验原理

实时荧光定量PCR （Quantitative Real-time PCR）是一种在DNA扩增反应中，以荧光化学物质测每次PCR循环后产物总量的方法，通过内参或者外参法对待测样品中的特定DNA序列进行定量分析的方法；
Real-timePCR是在PCR扩增过程中，通过荧光信号，对PCR进程进行实时检测。由于在PCR扩增的指数时期，模板的Ct值和该模板的起始拷贝数存在线性关系，所以成为定量的依据。

实验步骤

基因引物设计；
提取总RNA，对RNA样本进行定量；
测RNA浓度，跑核酸电泳；
RNA逆转录为cDNA；
qPCR扩增目的基因及内参基因；
数据分析，实验报告整理。

案例展示