您的当前位置：

首页 / 科研服务 / FISH

FISH

来源：分子生物学研究平台

实验原理

荧光原位杂交技术（Fluorescence in situ hybridization,FISH）是一种重要的非放射性原位杂交技术，用已知的荧光染料标记单链核酸为探针，按照碱基互补配对原则，与待测的RNA特异结合，二者经变性—退火—复性，即可形成靶DNA与核酸探针的杂交体。经洗涤后直接在荧光显微镜下对待测样本的核酸进行定性、定量或相对定位分析。

实验流程

原位杂交探针序列的获取
原位杂交探针的制备：（1）总RNA的提取，（2）cDNA的获取,（3）PCR扩增探针序列，（4）PCR产物的纯化，（5）探针序列PCR产物连接载体与载体的扩增，（6）质粒的小量制备，（7）RNA探针的制备。
细胞组织制片复水
蛋白酶K消化
变性杂交
洗涤复染
细胞核染色

案例展示